DNA methylation analysis Анализ метилирования ДНК ДНҚ метилденуін талдау

Epigenetics · Native nanopore detection (5mC, 5hmC) · Bisulfite methods · Differential methylation Эпигенетика · Нативная детекция на нанопорах (5mC, 5hmC) · Бисульфитные методы · Дифференциальное метилирование Эпигенетика · Нанопораларда нативті детекция (5mC, 5hmC) · Бисульфиттік әдістер · Дифференциалды метилдену

About the service Об услуге Қызмет туралы

DNA methylation is the central epigenetic mark: it regulates gene expression without changing the sequence and responds to development, stress, and environment. We measure it two complementary ways. Nanopore sequencing (ONT) reads 5mC and 5hmC directly from native DNA — no bisulfite conversion, genome-wide profiles and methylation phased to individual alleles in one experiment. Targeted bisulfite methods — bisulfite Sanger sequencing and methylation-specific PCR — verify individual CpG sites and promoters at low cost across large sample series. Метилирование ДНК — центральная эпигенетическая метка: она регулирует экспрессию генов без изменения последовательности и реагирует на развитие, стресс и среду. Мы измеряем её двумя взаимодополняющими способами. Нанопоровое секвенирование (ONT) читает 5mC и 5hmC непосредственно с нативной ДНК — без бисульфитной конверсии, полногеномные профили и метилирование, фазированное по отдельным аллелям, в одном эксперименте. Таргетные бисульфитные методы — бисульфитное секвенирование по Сэнгеру и метил-специфичная ПЦР — проверяют отдельные CpG-сайты и промоторы с низкой стоимостью на больших сериях образцов. ДНҚ метилденуі — орталық эпигенетикалық белгі: ол тізбекті өзгертпей ген экспрессиясын реттейді және дамуға, стреске, ортаға жауап береді. Біз оны бірін-бірі толықтыратын екі тәсілмен өлшейміз. Нанопоралық секвенирлеу (ONT) 5mC мен 5hmC-ні нативті ДНҚ-дан тікелей оқиды — бисульфиттік конверсиясыз, бір экспериментте толық геномдық профильдер және жеке аллельдер бойынша фазаланған метилдену. Нысаналы бисульфиттік әдістер — Сэнгер бойынша бисульфиттік секвенирлеу және метил-спецификалық ПТР — жекелеген CpG-сайттар мен промоторларды үлкен үлгі серияларында аз шығынмен тексереді.

The result is not just methylation calls but biology: differentially methylated regions between groups, promoter states linked to expression, and epigenetic variation in breeding material — with statistics designed before the experiment starts. Результат — не просто уровни метилирования, а биология: дифференциально метилированные регионы между группами, состояния промоторов, связанные с экспрессией, и эпигенетическая изменчивость селекционного материала — со статистикой, спланированной до начала эксперимента. Нәтиже — жай метилдену деңгейлері емес, биология: топтар арасындағы дифференциалды метилденген аймақтар, экспрессиямен байланысты промотор күйлері және селекциялық материалдың эпигенетикалық өзгергіштігі — эксперимент басталғанға дейін жоспарланған статистикамен.

For methylation work the formats presented below provide CpG minisequencing (SNaPshot), bisulfite assay design, methylation-specific qPCR with TaqMan probes, and the methylation-specific MLPA variant (MS-MLPA); primers and probes are designed and synthesized within our В анализе метилирования представленные ниже форматы дают минисеквенирование CpG-сайтов (SNaPshot), дизайн бисульфитных систем, метил-специфичную qPCR с зондами TaqMan и метил-специфичный вариант MLPA (MS-MLPA); праймеры и зонды разрабатываются и синтезируются в рамках услуги Метилденуді талдауда төменде ұсынылған форматтар CpG-сайттарды минисеквенирлеуді (SNaPshot), бисульфиттік жүйелер дизайнын, TaqMan зондтарымен метил-спецификалық qPCR-ді және MLPA-ның метил-спецификалық нұсқасын (MS-MLPA) береді; праймерлер мен зондтар мына қызмет аясында жобаланып, синтезделеді: primers and probes service«Праймеры и зонды»«Праймерлер мен зондтар».

Typical applications Типичные задачи Типтік тапсырмалар

  • Genome-wide methylation profiles (methylomes)Полногеномные профили метилирования (метиломы)Толық геномдық метилдену профильдері (метиломдар)
  • Promoter methylation of target genes and its link to expressionМетилирование промоторов целевых генов и его связь с экспрессиейНысаналы гендердің промоторларының метилденуі және оның экспрессиямен байланысы
  • Differentially methylated regions between treatments, tissues, and phenotypesДифференциально метилированные регионы между обработками, тканями и фенотипамиӨңдеулер, ұлпалар және фенотиптер арасындағы дифференциалды метилденген аймақтар
  • Epigenetic responses to stress in plants and animalsЭпигенетические ответы на стресс у растений и животныхӨсімдіктер мен жануарлардағы стреске эпигенетикалық жауаптар
  • Epigenetic stability of in vitro and micropropagated materialЭпигенетическая стабильность материала in vitro и микроразмноженияIn vitro және микрокөбейтілген материалдың эпигенетикалық тұрақтылығы
  • Research validation of methylation biomarkersИсследовательская валидация биомаркеров метилированияМетилдену биомаркерлерін зерттеу мақсатында валидациялау
Technologies Технологии Технологиялар

Approaches to methylation analysis Подходы к анализу метилирования Метилденуді талдау тәсілдері

Native nanopore detection Нативная детекция на нанопорах Нанопораларда нативті детекция

5mC · 5hmC

Nanopore sequencing detects base modifications directly from the electrical signal of native DNA: genome-wide 5mC and 5hmC maps without bisulfite conversion and its degradation artifacts, and — thanks to long reads — methylation assigned to individual alleles and repeat regions. Нанопоровое секвенирование определяет модификации оснований непосредственно по электрическому сигналу нативной ДНК: полногеномные карты 5mC и 5hmC без бисульфитной конверсии и её деградационных артефактов, а благодаря длинным прочтениям — метилирование, отнесённое к отдельным аллелям и районам повторов. Нанопоралық секвенирлеу негіз модификацияларын нативті ДНҚ-ның электрлік сигналынан тікелей анықтайды: бисульфиттік конверсиясыз және оның деградациялық артефактілерінсіз толық геномдық 5mC және 5hmC карталары, ал ұзын оқылымдардың арқасында — жеке аллельдер мен қайталану аймақтарына жатқызылған метилдену.

Targeted bisulfite methods Таргетные бисульфитные методы Нысаналы бисульфиттік әдістер

CpG sitesCpG-сайтыCpG-сайттар

Bisulfite conversion followed by Sanger sequencing of target regions and methylation-specific PCR for known loci: single-CpG resolution in the promoters you care about, an economical format for screening large sample series, and independent validation of genome-wide findings. Бисульфитная конверсия с последующим секвенированием целевых участков по Сэнгеру и метил-специфичная ПЦР для известных локусов: разрешение до отдельного CpG в интересующих промоторах, экономичный формат для скрининга больших серий образцов и независимая валидация полногеномных находок. Бисульфиттік конверсия, одан кейін нысаналы учаскелерді Сэнгер бойынша секвенирлеу және белгілі локустарға метил-спецификалық ПТР: қызықтыратын промоторларда жеке CpG-ге дейінгі ажыратымдылық, үлкен үлгі серияларын скринингтеуге үнемді формат және толық геномдық нәтижелерді тәуелсіз валидациялау.

Differential methylation analysis Анализ дифференциального метилирования Дифференциалды метилденуді талдау

DMR

Bioinformatics that turns methylation calls into findings: differentially methylated regions between groups, annotation against genes and regulatory elements, integration with expression data, and publication-quality visualization — with replicates and statistics planned in advance. Биоинформатика, превращающая уровни метилирования в результаты: дифференциально метилированные регионы между группами, аннотация по генам и регуляторным элементам, интеграция с данными экспрессии и визуализация публикационного качества — с повторностями и статистикой, спланированными заранее. Метилдену деңгейлерін нәтижеге айналдыратын биоинформатика: топтар арасындағы дифференциалды метилденген аймақтар, гендер мен реттеуші элементтер бойынша аннотациялау, экспрессия деректерімен біріктіру және жарияланымдық сапада визуализация — алдын ала жоспарланған қайталанулармен және статистикамен.

Epigenetics in applied projects Эпигенетика в прикладных проектах Қолданбалы жобалардағы эпигенетика

Breeding · MedicineСелекция · МедицинаСелекция · Медицина

Stress epigenetics and epigenetic variation in crops and livestock, control of epigenetic stability in material propagated in vitro within our Эпигенетика стресса и эпигенетическая изменчивость сельскохозяйственных культур и животных, контроль эпигенетической стабильности материала, размноженного in vitro в рамках услуги Дақылдар мен жануарлардың стресс эпигенетикасы және эпигенетикалық өзгергіштігі, мына қызмет аясында in vitro көбейтілген материалдың эпигенетикалық тұрақтылығын бақылау: cell culture and plant transformation service«Клеточные культуры и трансформация растений»«Жасуша өсінділері және трансформация», and research studies of methylation markers in medical and veterinary projects — as research support, not clinical diagnostics. а также исследовательское изучение маркеров метилирования в медицинских и ветеринарных проектах — как научная поддержка, а не клиническая диагностика. сондай-ақ медициналық және ветеринариялық жобалардағы метилдену маркерлерін зерттеу — клиникалық диагностика емес, ғылыми қолдау ретінде.

Dual-labelled qPCR probes qPCR-зонды с двойной меткой Қос таңбалы qPCR зондтары

TaqMan · MGB

TaqMan, MGB, and molecular-beacon probes for quantitative allelic discrimination — allele-specific pairs with matched melting temperatures and minimal cross-reactivity, including a multiplex mode. Зонды TaqMan, MGB и molecular beacon для количественной аллельной дискриминации — аллель-специфичные пары с согласованными температурами плавления и минимальной перекрёстной реактивностью, включая мультиплексный режим. Сандық аллельдік дискриминацияға арналған TaqMan, MGB және molecular beacon зондтары — балқу температуралары үйлестірілген, айқас реактивтілігі минималды аллель-спецификалық жұптар, мультиплексті режимді қоса.

SNaPshot

MinisequencingМинисеквенированиеМинисеквенирлеу

Single-base-extension primers for multiplex SNP and InDel genotyping by capillary electrophoresis. The same chemistry also supports BAC fingerprinting and CpG-methylation minisequencing. Праймеры однонуклеотидного удлинения для мультиплексного генотипирования SNP и инделов капиллярным электрофорезом. Та же химия поддерживает BAC-фингерпринтинг и минисеквенирование CpG-метилирования. Капиллярлық электрофорезбен SNP мен инделдерді мультиплексті генотиптеуге арналған бір негізді ұзарту праймерлері. Сол химия BAC-фингерпринтинг пен CpG-метилденуді минисеквенирлеуді де қолдайды.

MLPA / digitalMLPA

LPO + RPO

Ligation-dependent half-probe pairs (LPO + RPO) with stuffer sequences and universal tags for copy-number, SNP, and InDel detection by capillary electrophoresis — or, for panels of up to 1000 targets, by sequencing (digitalMLPA). Лигазозависимые пары полузондов (LPO + RPO) со стаффер-последовательностями и универсальными тегами для детекции числа копий, SNP и инделов капиллярным электрофорезом — или, для панелей до 1000 мишеней, секвенированием (digitalMLPA). Көшірмелер санын, SNP мен инделдерді капиллярлық электрофорезбен — немесе 1000-ға дейінгі нысана панельдері үшін секвенирлеумен (digitalMLPA) — анықтауға арналған стаффер-тізбектері мен әмбебап тегтері бар лигазаға тәуелді жартылай зонд жұптары (LPO + RPO).

STR/SSR fragment analysis Фрагментный анализ STR/SSR STR/SSR фрагменттік талдау

Universal tailsУниверсальные хвостыӘмбебап құйрықтар

Flanking primers for microsatellite genotyping by capillary-electrophoresis fragment sizing — with economical universal-tail fluorescent labelling and automatic dye and size assignment in multiplexes. Фланкирующие праймеры для генотипирования микросателлитов по размерам фрагментов в капиллярном электрофорезе — с экономичным флуоресцентным мечением через универсальные «хвосты» и автоматическим распределением красителей и размеров в мультиплексах. Микросателлиттерді капиллярлық электрофорезде фрагмент өлшемдері бойынша генотиптеуге арналған фланктеуші праймерлер — әмбебап «құйрықтар» арқылы үнемді флуоресценттік таңбалау және мультиплекстерде бояғыштар мен өлшемдерді автоматты бөлу.

PCR · Multiplex · QF-PCR

Assay designДизайн системЖүйелер дизайны

A general-purpose assay-design engine covering standard, inverse, multiplex, TaqMan/MGB-probe, bisulfite, and RPA formats. The quantitative-fluorescent (QF-PCR) mode generates STR-flanking primers for gene-dosage and copy-number analysis. Универсальный дизайн тест-систем: стандартный, инвертированный, мультиплексный, TaqMan/MGB-зондовый, бисульфитный и RPA-форматы. Количественно-флуоресцентный режим (QF-PCR) генерирует STR-фланкирующие праймеры для анализа дозы генов и числа копий. Тест-жүйелердің әмбебап дизайны: стандартты, инверсті, мультиплексті, TaqMan/MGB-зондты, бисульфиттік және RPA форматтары. Сандық-флуоресценттік режим (QF-PCR) ген дозасы мен көшірмелер санын талдауға арналған STR-фланктеуші праймерлерді жасайды.

TSDR toehold exchange probes TSDR: toehold-зонды TSDR: toehold зондтары

SNP

Toehold-mediated strand-displacement exchange probes for high-specificity SNP and allele discrimination: the probe is tuned to a near-thermoneutral reaction and scores single-base mismatches using measured nearest-neighbour thermodynamics. Toehold-зонды обменного вытеснения цепей для высокоспецифичной дискриминации SNP и аллелей: зонд настраивается на почти термонейтральную реакцию и различает однонуклеотидные несоответствия на основе измеренной термодинамики ближайших соседей. SNP мен аллельдерді жоғары спецификалықпен ажыратуға арналған toehold-медиацияланған тізбекті ығыстырып алмастыру зондтары: зонд термобейтарапқа жуық реакцияға бапталады және бір негізді сәйкессіздіктерді жақын көршілер термодинамикасының өлшенген мәндері негізінде ажыратады.

What you receive Что вы получаете Сіз не аласыз

  • Raw sequencing data and per-site methylation tablesПервичные данные секвенирования и таблицы метилирования по каждому сайтуБастапқы секвенирлеу деректері және әр сайт бойынша метилдену кестелері
  • Lists of differentially methylated regions with annotationСписки дифференциально метилированных регионов с аннотациейАннотациясы бар дифференциалды метилденген аймақтар тізімдері
  • Figures: methylation profiles, group comparisons, target-locus plotsИллюстрации: профили метилирования, сравнения групп, графики целевых локусовСуреттер: метилдену профильдері, топтарды салыстыру, нысаналы локус графиктері
  • A written report with methods described for the Methods sectionПисьменный отчёт с описанием методов, готовым для раздела MethodsMethods бөліміне дайын әдістер сипаттамасы бар жазбаша есеп

Starting material Исходный материал Бастапқы материал

Native nanopore detection needs high-molecular-weight DNA without amplification — fresh or properly frozen tissues and cells are ideal; targeted bisulfite assays are less demanding. Extraction with integrity control is performed as part of our Нативная детекция на нанопорах требует высокомолекулярной ДНК без амплификации — идеальны свежие или правильно замороженные ткани и клетки; таргетные бисульфитные тесты менее требовательны. Выделение с контролем целостности выполняется в рамках услуги Нанопораларда нативті детекция амплификациясыз жоғары молекулалық ДНҚ-ны қажет етеді — жаңа немесе дұрыс мұздатылған ұлпалар мен жасушалар өте қолайлы; нысаналы бисульфиттік тесттердің талабы төмен. Тұтастығы бақыланатын бөліп алу мына қызмет аясында орындалады: DNA and RNA extraction service«Выделение ДНК и РНК»«ДНҚ және РНҚ бөліп алу».

Methylation is tissue- and time-specific, so sampling design, replicates, and comparison groups are agreed before the experiment starts — they determine whether differences can be interpreted at all. Метилирование специфично для ткани и момента времени, поэтому дизайн отбора, повторности и группы сравнения согласовываются до начала эксперимента — именно они определяют, можно ли вообще интерпретировать различия. Метилдену ұлпаға және уақыт сәтіне тән, сондықтан іріктеу дизайны, қайталанулар және салыстыру топтары эксперимент басталғанға дейін келісіледі — айырмашылықтарды түсіндіру мүмкіндігін дәл осылар анықтайды.

Order methylation analysis Заказать анализ метилирования Метилдену талдауына тапсырыс беру

Describe the organism, tissues, comparison groups, and whether you need genome-wide profiles or specific loci — we will propose the approach and prepare a quote. Опишите организм, ткани, группы сравнения и что требуется — полногеномные профили или конкретные локусы, — мы предложим подход и подготовим расчёт стоимости. Организмді, ұлпаларды, салыстыру топтарын және нені қажет ететініңізді — толық геномдық профильдер ме, әлде нақты локустар ма — сипаттаңыз, біз тәсілді ұсынып, құн есебін дайындаймыз.

Related services: Связанные сервисы: Байланысты қызметтер: SequencingСеквенированиеСеквенирлеу · DNA and RNA extractionВыделение ДНК и РНКДНҚ және РНҚ бөліп алу · Data analysis and bioinformaticsАнализ данных и биоинформатикаДеректерді талдау және биоинформатика